CRISPR相关质粒服务

产品介绍:

基因编辑技术主要是利用序列特异性核酸酶在特定基因位点产生DNA双链断裂,借助编辑受体自身的DNA修复系统在非同源末端连接(Non-homologous end joining,NHEJ)过程中产生随机的Indels (Small insertions and deletions)或在同源重组修复过程中插入或替换相应的基因片段,最终实现基因组序列的突变。CRISPR/Cas9为新型的基因组编辑技术,拥有操作简单,效率高,特异性强,以及作用靶点多等优势,逐渐成为基因敲除的标准操作工具。目前,CRISPR/Cas9系统已经广泛用于对哺乳动物细胞,细菌,斑马鱼,小鼠,猪,猴的基因编辑。


技术原理:

在CRISPR/Cas9技术中,基因编辑的实现需要两个工具,一个是向导核糖核酸(gRNA),它可以引导Cas9蛋白到目标DNA区域,另一个是核酸内切酶Cas9蛋白,其中Cas9蛋白具有切割DNA片段的功能,可使DNA发生双链断裂,进而诱导细胞产生DNA 损伤修复。




应用领域:

1、 功能基因的敲除或突变;


2、 非编码区的编辑,例如对启动子、microRNA、lncRNA的基因序列进行编辑;


3、 单碱基编辑、精准碱基编辑;


4、 非同源/同源多基因敲除、代谢通路多基因敲除;


5、 目的基因的大片段删除。


我们的优势:

● 采用已被授权的国际PCT专利技术进行sgRNA的片段组装及无缝组装,同时,对于单个、多个sgRNA序列均可进行组装;


● 载体资源丰富,根据您研究的物种、靶序列,均有对应经多次编辑效率测试后的最优原始载体骨架推荐,也可个性化订制您有其它需求的基因编辑载体;


● 基因编辑载体库中有多种真核筛选标记(可选潮霉素、Basta或G418进行筛选)的原始载体可供选择,同时,多基因编辑、单碱基编辑、精准碱基编辑等特殊基因编辑系统也可满足您的特殊实验需求;


● 载体多样,可直接应用于后期遗传转化;


● 可以与我司转基因服务、检测服务、蛋白服务等衔接,整个实验可以畅通且快速地完成。


实验交付内容:

1、重组质粒载体的全序列信息和注释信息;


2、重组质粒载体的酶切图谱;


3、重组质粒载体的测序结果;


4、重组质粒载体:一份提纯质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌);


文献案例:

Gao Y, Wei W, Zhao X, Tan X, Fan Z, Zhang Y, Jing Y, Meng L, Zhu B, Zhu H, Chen J, Jiang CZ, Grierson D, Luo Y, Fu DQ, 2018. A NAC transcription factor, NOR-likel, is a new positive regulator of tomato fruit ripening. Hortic Res. 5:75.



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