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小沐同学(AI)|单细胞测序100问(46)

2023-11-13

来源:上海百沐生物科技有限公司

所属分类:单细胞测序100问

Q:细胞分选原理及应用,几种方法该如何选择?

A:

细胞分选(cell sorting)是指根据细胞所具有的特性把某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术,它是对某一特定细胞进行生化分析和功能分析的前提和基础。

细胞分选方法总体上可分为三种:基于细胞培养特性的分选技术、基于细胞物理性能的分选技术基于生化亲和力的细胞分选技术。

(1)基于细胞培养特性的分选技术:该方法是一种比较简单的细胞分离技术,根据细胞在培养过程中的不同黏附能力进行分离,贴壁细胞是该方法的主要目标细胞。但细胞的贴壁生长情况受限于多种因素,其分选的细胞包含较多非目标细胞,纯度偏低;而且分选过程需进行细胞培养,耗时较长,可能会造成细胞功能和基因表达的丧失。

(2)基于细胞物理性能的分选技术:该方法通常基于细胞本身的物理特性(如大小或密度等),在外部作用(如声波、流体动力和电场等)条件下,对目标细胞进行分离纯化。如通过密度梯度离心分选不同沉降系数的细胞、通过过滤分选不同大小的细胞。

(3)基于生化亲和力的细胞分选技术:该方法通过与细胞表面的亲和配体形成分子间作用力或作为标记识别来分离细胞,其分选方法有三种:

  • 基于亲和层析柱的细胞分选方法, Cell-affinity Chromatography(CAC);

  • 基于流式细胞技术的分选方法,Fluorescence-Activated Cell Sorting (FACS);

  • 基于磁珠分离纯化的细胞分选方法,Magnet-Activated Cell Sorting (MACS)。


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